PCR扩增时,体系中有多种模板对结果有什么影响?

科学兴农为您解答 。

这种问题建议您去小木虫去咨询,作为学术性探讨问题,悟空问答平台上面对这一块接触的人数毕竟还是太少 。不过既然看到了,就针对您这个问题做一下简单的解答 。

关于您的问题来说,首先要搞清楚您PCR的目的是什么,如果说是为了检测某个基因的存在,当你加入 多种模板的时候可能会对结果形成干扰,也就是说扩增到另外一个模板上的片段,如果说模板A和B的扩增带型大小不一致的话,这时候自然扩增结果也就是两条带,那么这个时候您该如何判定带型呢?如果说差别是很大的话还好,但是如果仅仅差别了几十个碱基的话,也就难以分辨谁是谁了(琼脂糖凝胶电泳) 。

再举个例子来说,如果说您是检测一堆种子是否被转基因所污染,以Kan抗性来说,只需要检测NTPII即可,这个时候,我只需要将一堆样品的模板混合在一起,来做PCR,如果能够检测出条带的话,必然是被 污染了,这个时候,将模板混合在一起要比模板分别做样品检测省出很多功夫 。

【PCR扩增时,体系中有多种模板对结果有什么影响?】实验要灵活,根据您的目的自由分配您的实验,不能污染的地方必然不能污染,而可以污染的地方您“污染”的处理反而可能是捷径!

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