ung防止什么污染
pcr 。标本间交叉污染、PCR试剂的污染、PCR扩增产物污染、实验室中克隆质粒的污染 。
1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染 。
2、PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染 。
3、PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题 。因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性 。最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染 。在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染 。据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题 。
4、实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见 。因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力 。其污染可能性也很大 。
【ung防止什么污染】聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加 。因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对 。这也是微量证据的威力之所在 。由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真正诞生 。到如今2013年,PCR已发展到第三代技术 。1976年,中国科学家钱嘉韵,发现了稳定的Taq DNA聚合酶,为PCR技术发展也做出了基础性贡献 。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5-3)的方向合成互补链 。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制 。
推荐阅读
- 唐朝时中国的最高学府是什么
- 远古剑魂用什么阵容刷
- 植物乳酸菌是什么意思
- 酒肆是什么意思?古代买酒的小店
- 民族文化揭秘:彝族向天坟是什么
- 中国未识别民族,西双版纳克木人是什么人
- 信息流广告研究的意义 信息流广告是什么意思
- 王者霸气单字好听的名字 分别都是什么
- 创造与魔法狼人6阶技能 创造与魔法狼人6阶技能是什么
- 蜗牛追击有啥用 最强蜗牛追击属性有什么用