LD 《临床生物化学》 乳酸脱氢酶及其同工酶
乳酸脱氢酶(LD)酶催化下列反应:
[imgz]linchuangshengwuhuaxue054.jpg[alt]乳酸脱氢酶(LD)酶催化反应:[/alt][/img]
不同方法测出LD结果差异较大 , 这是因为LD有5种不同的同工酶 , 每种同工酶的最适反应条件不同 。例如同为催化乳酸变为丙酮酸 , LD[XB]1[/XB]的最适pH为9.8 , 而LD[XB]5[/XB]的最适pH为8.8 。很难找出一个测定血清总LD的最适条件 , 检验医师在解释测定结果时应加以注意 。
LD催化反应是无氧糖酵解的最终反应 , 广泛存在于人体各组织中 , 故测总酶临床意义不大 , 但LD是由两种不同亚基(M , H)组成的四聚体 , 形成5种结构不同的同工酶 , 其中H型亚基中酸性氨基酸较多 , 电泳时负电荷多 , 因此电泳速率较快 。按电泳向阳极泳动快慢 , 分别命名为LD[XB]1[/XB](H[XB]4[/XB]) , LD[XB]2[/XB](H[XB]3[/XB]M) , LD[XB]3[/XB](H[XB]2[/XB]M[XB]2[/XB]) , LD[XB]4[/XB](HM[XB]3[/XB])和LD[XB]5[/XB](M[XB]4[/XB]) 。
【组织分布】
LD虽广泛存在于人体各组织中 , 但是不同组织中同工酶组成有差异 , 大致可分为三类:一类以LD[XB]1[/XB]为主 , 心肌为此类代表 , LD可占总酶活性50%以上 , 此外有红细胞等 。另一类以LD[XB]5[/XB]为主 , 以横纹肌为代表 , 此外有肝脏等 。第三类以LD[XB]3[/XB]为主 , 脾、肺为此类代表 。LD主要存在于细胞质中 , 线粒体中未查到 。
【生理变异】
血清LD高低和性别关系不大 , 婴儿酶活性可达成年人两倍 , 儿童和少年活性比成年人高10%-15% , 血清LD同工酶目前常用电泳法测定 , 由于具体方法差异 , 各学者报告的结果出入较大 , 但在成年人存在着如下规律:LD[XB]2[/XB]>LD[XB]1[/XB]>LD[XB]3[/XB]>LD[XB]4[/XB]>LD[XB]5[/XB] , 值得注意的是有学者报告 , 部分正常儿童血中LD[XB]1[/XB]可大于LD[XB]2[/XB] 。
【标本的采集、处理和贮存】
由于血小板中也含大量LD , 血清中和血浆所测LD有一定差异 , 一般都选用血清为测定标本 , 采血后应迅速分离血清 , 因红细胞中LD含量比血清高100倍以上 , 不宜用溶血血清为测定标本 。
LD尤其是LD[XB]4[/XB]和LD[XB]5[/XB]与其它酶不同 , 不是热变性而是冷变性 , 在4℃贮存活性下降快于室温25℃ , 一般说25℃放2-3天LD活性变化不大 , 有条件者最好还是在采血后24小时内测定 , 标本应贮存于室温 。
【参考值范围】
根据催化反应方向的不同 , 有两大类测LD方法 , 一大类为国际临床化学协会(IFFC)推荐方法 , 以丙酮酸为底物 , 其参考值范围为80-500U/L(37℃);另一大类以乳酸为底物 , 在我国应用较普遍 , 其参考值范围为50-150U/L 。
【临床应用】
LD及其同工酶是临床上常用酶之一 , 尤其是LD同工酶和CK-MB是临床常规实验室最常测的两种同工酶 。临床常用于诊断和鉴别诊断心、肝和骨骼肌的疾病 。表7-5是LD及其同工酶在这些疾病时的变化情况 。
表7-5 总LD和LD同工酶在疾病的变化
疾病总LDLD同工酶AMI常测酶中 , 升高最慢(8-10h) , 但升高时间最长(5-10d) , 峰值可达10倍正常上限LD[XB]1[/XB]>LD[XB]2[/XB] , 并可持续到两周(部分病例总LD正常)充血性心衰 , 心肌炎可升高达5倍正常上限LD[XB]1[/XB]>LD[XB]2[/XB]增巨细胞性贫血可升高达5倍正常上限 , 治疗正确迅速下降LD[XB]1[/XB]>LD[XB]2[/XB]病毒性肝炎部分病例可升高达5倍正常上限LD[XB]5[/XB]>LD[XB]4[/XB](部分病例总LD正常肝硬化常轻度升高LD[XB]5[/XB]明显升高 , LD[XB]5[/XB]>LD[XB]4[/XB]高原发性肝癌部分病例升高LD[XB]5[/XB]明显升高 , LD[XB]5[/XB]>LD[XB]4[/XB]梗阻性黄疸不定常LD[XB]4[/XB]>LD[XB]5[/XB]肌肉损伤视损伤程度不同而异以LD[XB]5[/XB]升高为主肌萎缩可高达10倍正常上限以LD[XB]5[/XB]为主某些恶性肿瘤(白血病 , 结肠癌……)可升高 , 个别病例高达5倍正常上限以LD[XB]3[/XB]为主 , LD[XB]3[/XB]>LD[XB]1[/XB]变异某些病倒 , 电泳出现LD[XB]6[/XB] , 常显示预后不佳
实用中此酶用于诊断AMI , 特别是亚急性AMI 。在AMI时 , LD由于分子量较大(125000) , 在常用酶中升高最迟 , 但其半寿期较长 , 增高持续时间可达5-10天 , 此时其它酶活性已恢复正常 , 在亚急性AMI诊断上有一定价值 。可惜的是 , LD总酶诊断AMI的特异性较差 , 很多其它疾病 , 此酶都升高 。LD同工酶则不同 , 诊断特异性可达95%以上 , 仅次于CK-MB , 甚至有学者认为 , 只要测此二同工酶 , 不需作其它酶学检查就可诊断AMI 。LD同工酶的高特异性是因为人体各组织器官中LD同工酶的分布情况并不相同 , 除心肌外 , 只有少数器官如红细胞中的LD是以LD[XB]1[/XB]为主 , 绝大多数的AMI患者血中的LD同工酶都可出现LD[XB]1[/XB]>LD[XB]2[/XB]变化 , 即所谓的“反转”(flip)类型变化 , 其持续时间甚至可超过总LD升高时间 , 达两周之久 。临床上可见部分患者在恢复期 , 所有酶活性都降至正常 , 但仍有“反转”类型的LD同工酶变化 , 这些患者常有复发倾向 , 除AMI和心肌损伤 , 此种“反转”类型变化还见于溶血性贫血和巨细胞性贫血 , 但此类疾病在临床上不难与AMI相区分 。
60年代临床上曾经用过所谓“α-羟丁酸脱氢酶”的测定来诊断AMI 。实际上并不存在这种酶 , 所测的主要是LD[XB]1[/XB]的活性 , 目前国外已较少测定此酶而改用更精确的测LD同工酶的方法 。
其次 , LD及其同工酶常用于肝脏疾病的诊断和鉴别诊断 , 由于肝细胞中主要为LD[XB]1[/XB] , 在肝实质病变时常出现LD[XB]5[/XB]>LD[XB]4[/XB] , 但由于正常血清中LD[XB]5[/XB]含量很少 , 不少病例就是出现同工酶异常LD[XB]5[/XB]>LD[XB]4[/XB]时 , 总LD活性仍为正常 , 故LD同工酶检查阳性率远高于总LD , 一般在胆道疾患或梗性黄疸早期未累及肝实质时 , 不出现LD[XB]5[/XB]>LD[XB]4[/XB] , 仍为LD[XB]4[/XB]>LD[XB]5[/XB] 。值得注意的是 , 在骨骼肌疾病和损伤时 , 也会出现类似变化 , 临床上诊断各型肌萎缩也常测定LD及LD同工酶 , 早期常为LD[XB]5[/XB]升高 , 但在晚期LD[XB]1[/XB]和LD[XB]2[/XB]也升高 。
恶性肿瘤可由于肿瘤细胞恶性增长和坏死而引起血清LD升高 , 如转移到肝脏往往伴有LD[XB]4[/XB]和LD[XB]5[/XB]升高 , 此外一部分肿瘤 , 如白血病等常有LD[XB]3[/XB]和LD[XB]4[/XB]的增高 。
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