四 《实用免疫细胞与核酸》 TaqDNA聚合酶的量
典型PCR反应混合物中 ， 所用酶浓度为2.5U/μl ， 常用范围为1～4U/100μl 。由于DNA模板的不同和引物不同 ， 以及其它条件的差异 ， 多聚酶的用量亦有差异 ， 酶量过多会导致非特异产物的增加 。
由于生产厂家所用兵配方、制造条件以及活性定义不同 ， 不同厂商供应的TaqDNA聚合酶性能也有所不同 。
Cetus公司酶定义是：1个酶单位是指在以下分析条件下 ， 于74℃ ， 30min内使10nmmol的dNTP掺入酸不溶性成分所需的酶 。测定时间为10min ， 折算成30min掺入量 。
分析条件为25nmol/L TAPS（三羟基-甲基-氨基丙烷磺酸钠pH9.3,25℃）,50mmol/l KCl, 2mmol/L MgCl[XB]2[/XB],1mmol/L β-ME（巯基乙醇） ， dATP、dTTP、dGTP各200mmol/L ， dCTP为100mmol/L(由不标记及α-[SB]32[/SB]P标记混合) ， 12.μg变性鲱鱼精子DNA ， 最终体积50μl 。
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