《动脉粥样硬化》 无脂蛋白血清的制备

1.用途:无脂蛋白血清(lipoprotein deficient serum,LPDS)主要用于LDL受体活性测定的细胞培养 。
2.操作:常规采血 , 室温放置1~2h , 以3kr/min离心10min , 分离得到血清 。向血清中按每1ml加0.33496g KBr , 使其血清密度为d=1.215 , 或者按等体积加d=1.215的KBr液 , 按前述两方法铺在血清上面 , 按40kr/min(100k×g)速度 , 离心40h 。离心完毕 , 将淡黄色上层脂蛋白与无色的中间层除去 , 下层液上再铺d=1.215溶液 , 重复上述离心操作 。将下层液 , 对0.15mol/l NaCl,0.3mmol/L EDTA(pH8.0) 溶液透析 , 用过滤器除菌 , 尔后分成小包装贮存在-20℃备用 。
六、其他方法
除上述介绍的常用方法外 , 还有凝胶过滤和高压液相层析法分离血浆脂蛋白的方法 , 有关参考书很多 , 在此不一一介绍 。

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