浓度|知识分享:ADV-HR试剂说明书


浓度|知识分享:ADV-HR试剂说明书
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【维真生物】提供现货产品、载体构建、病毒包装、细胞系建立等服务
一、产品概述:
产品名称: ADV-HR(病毒助感染试剂) 产品货号:FH880805
规格:1ml(标准规格)/100ul(赠送规格) 浓度:1mg/ml
二、储存条件:
建议分装后保存于-20℃ , 一周内使用4℃储存即可 。 注意避免反复冻融!反复冻融会严重影响实验效果 , 请予一周内使用!
三、产品原理:
ADV-HR(病毒助感染试剂)试剂通过物理吸附将病毒富集在细胞表面 , 从而增加病毒对细胞的感染效率 , 起到助感染的效果 。
四、产品优点:
1、腺病毒、慢病毒感染均可使用;
2、可显著提高感染效率;
3、与同类型试剂产品相比毒性更低 。
五、实验举例:
(一)直接加入法(适用于较易感染的细胞类型)
1、进行病毒感染时 , 将ADV-HR试剂直接加入培养皿/孔/瓶中 , 混匀即可 。
2、后续操作依病毒类型和实验需要而定 。
(二)孵育法(适用于较难感染的细胞类型)
以6孔板为例:
1、在1.5mL EP管中建立100μL感染体系如下所示:
①ADV-HR XuL
②病毒 YμL
③细胞悬液 (100-X-Y) μL (含1.0×106个细胞)
(其中ADR-HR用量X需参照附2及预实验结果;病毒用量Y需参照病毒滴度及实验所需MOI 。 )
用移液器轻轻吹打混匀 , 于37℃细胞培养箱中孵育0.5-1个小时 。
3、用移液器将感染体系中的细胞轻轻悬起 , 全部转移至预先加有2mL培养液的6孔板中 , 37℃、5%CO2培养箱中培养 。
4、后续操作依病毒类型和实验需要而定 。
六、特别注意:
1、高浓度的ADV-HR具有细胞毒性 , 影响细胞状态和感染效率(详见附2) 。 我们建议您务必于目的细胞中进行ADV-HR浓度梯度预实验 。
2、本试剂仅供与我公司的病毒产品搭配使用 , 和其他公司产品搭配使用所产生的一切后果均与我公司无关 , 本产品的最终解释权归我公司所有 。
附1 ADV-HR使用案例
腺病毒感染A549细胞41h后拍摄的荧光图片:

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慢病毒感染CNE2细胞72h后拍摄的荧光图片:

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【浓度|知识分享:ADV-HR试剂说明书】附2 摸索助感染试剂ADV-HR的使用极值实验

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实验规模:96孔板(定容至100μL)
ADV-HR浓度:1mg/mL
说明:
1、ADV-HR终浓度在0至1.0×10-2mg/mL之间对细胞状态无影响;
2、ADV-HR终浓度在2.5×10-2mg/mL时细胞生长缓慢;
3、ADV-HR终浓度在5.0×10-2至1.0×10-1mg/mL时细胞呈现明显破碎 ,2.5×10-1至5.0×10-1mg/mL时细胞皱缩甚至停止生长 。
建议:
1、请在使用ADV-HR前于目的细胞中进行浓度梯度预实验;
2、建议ADV-HR的使用浓度不超过2.5×10-2mg/mL 。

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