LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统 ， 即原德国Amaxa 4D-Nucleofector核转系统 ， 结合电穿孔技术和细胞特异性转染液 ， 通过系统内置优化的转染程序 ， 将外源基因高效导入目标细胞的细胞质中 ， 并可直接入核 ， 整合到细胞染色体中 。
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Nucleofector核转系统可用于免疫细胞、干细胞、神经细胞、内皮细胞等较难转染的原代细胞和各类细胞系中 ， 其不依赖于病毒感染、不依赖于细胞有丝分裂 ， 可加快基因表达 ， 已成功转染1200余种细胞系、130余种原代细胞 ， 多数细胞系转染效率可高达50-70% ， 部分原代细胞转染效率可超过90% 。 目前 ， LONZA 4D-Nucleofector已大量应用于CAR-T细胞的研究中 。
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图.用Nucleofector细胞核转染系统 ， 将GFP标记的质粒转染新生儿皮肤成纤维细胞（NHDF-neo） ， 2小时后用3.5% PFA 固定 ， 共聚焦显微镜可观察到GFP蛋白在细胞核内表达 。
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LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统 ， 即原德国Amaxa 4D-Nucleofector核转系统 ， 结合电穿孔技术和细胞特异性转染液 ， 通过系统内置优化的转染程序 ， 将外源基因高效导入目标细胞的细胞质中 ， 并可直接入核 ， 整合到细胞染色体中 。
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Nucleofector核转系统可用于免疫细胞、干细胞、神经细胞、内皮细胞等较难转染的原代细胞和各类细胞系中 ， 其不依赖于病毒感染、不依赖于细胞有丝分裂 ， 可加快基因表达 ， 已成功转染1200余种细胞系、130余种原代细胞 ， 多数细胞系转染效率可高达50-70% ， 部分原代细胞转染效率可超过90% 。 目前 ， LONZA 4D-Nucleofector已大量应用于CAR-T细胞的研究中 。
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图.用Nucleofector细胞核转染系统 ， 将GFP标记的质粒转染新生儿皮肤成纤维细胞（NHDF-neo） ， 2小时后用3.5% PFA 固定 ， 共聚焦显微镜可观察到GFP蛋白在细胞核内表达 。
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统 ， 配备多种转染模块 ， 可满足不同细胞类型、不同数量、不同通量的转染实验需求；
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电转过程中配合使用不同细胞类型专用转染试剂 ， 转染效率远高于传统电转仪；
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采用由新型高分子聚合物制造的电极 ， 相比传统铝制电转杯 ， 杜绝金属离子毒害 ， 细胞转染后成活率更高 。
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为提高细胞核转染效率 ， 优化转染条件必不可少 ， 相比其他品牌 ， LONZA可提供全球共享的数据库 ， 可检索到700种以上的细胞转染数据和操作手册 ， 除转染操作指导外 ， 还提供细胞来源、传代、生长条件、培养基、转染后细胞培养基等各类技巧 ， 大大节省摸索时间和试剂耗材损耗 。
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4D-Nucleofector细胞核转染平台 ， 在小体积转染条件优化成功后 ， 可不改变转染条件 ， 直接用于大体积转染中 ， 一次获得最多1*10^9数量的细胞 ， 大大缩短实验时间 。
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统 ， 由1个主机加不同模块构成 ， 各模块可单独配置：
1.C模块（必选）：细胞核转染系统主机 ， 即核心模块（Core unit） ， 内置各类细胞转染程序 。
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2.X模块（可选）：最常选择的小体积转染模块 ， 用于各类悬浮细胞转染 。 允许使用2个电极杯和1个中通量16孔电极板条 。 其中电极杯为100uL体系 ， 适用于2*10^5至2*10^7数量细胞；16孔电极板条各孔为20uL体系 ， 适用于2*10^4至1*10^6数量细胞 ， 可同时转染16个样品 。
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3.Y模块（可选）：用于各类贴壁细胞的原位转染 ， 无需消化细胞 。 允许使用1个24孔电极板 ， 各孔为350uL体系 ， 可同时转染24个样品 。
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4.LV模块（可选）：用于一种细胞的大规模连续转染 。 允许使用电转盘 ， 其中小体积电转盘允许手动注射填充1mL ， 适用于1*10^7至1*10^8数量细胞；更大体积的电转盘允许以1mL体积不断进样 ， 配合储液罐或储液袋 ， 连续处理20mL体积 ， 最高可转染10^9数量细胞 。
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5.96孔模块（可选）：用于高通量细胞转染 ， 需要同时配置X模块 。 允许使用1个可拆卸的96孔电极板 ， 由6个16孔电极板条组成 ， 适用于2*10^4至1*10^6数量细胞 ， 可同时转染96个样品 ， 经常用于摸索转染条件 。
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相关文献
Ribonucleoprotein Transfection for CRISPR/Cas9-Mediated Gene Knockout in Primary T Cells.(Curr Protoc Immunol,2019,124(1):e69)
Engineering of CRISPR-Cas12b for human genome editing.(Nature,2019,10(1):212)
CRISPR-Cas9 genome engineering of primary CD4+ T cells for the interrogation of HIV-host factor interactions.(Nat Protocols,2019,14(1):1-27)
Bacteria-free minicircle DNA system to generate integration-free CAR-T cells.(J Med Genetics,2019,56:10-17)
Guide Swap enables genome-scale pooled CRISPR-Cas9 screening in human primary cells.(Nat Methods,2018,15(11))
Nucleofection with Plasmid DNA for CRISPR/Cas9-Mediated Inactivation of Programmed Cell Death Protein 1 in CD133-Specific CAR T Cells.(Hum Gene Ther,2018)
Optimized RNP transfection for highly efficient CRISPR/Cas9-mediated gene knockout in primary T cells.(J Exp Med,2018,215(3):985-997)
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统 ， 配备多种转染模块 ， 可满足不同细胞类型、不同数量、不同通量的转染实验需求；微信搜索“泽平科技”进入咨询报价 。
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电转过程中配合使用不同细胞类型专用转染试剂 ， 转染效率远高于传统电转仪；
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采用由新型高分子聚合物制造的电极 ， 相比传统铝制电转杯 ， 杜绝金属离子毒害 ， 细胞转染后成活率更高 。
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为提高细胞核转染效率 ， 优化转染条件必不可少 ， 相比其他品牌 ， LONZA可提供全球共享的数据库 ， 可检索到700种以上的细胞转染数据和操作手册 ， 除转染操作指导外 ， 还提供细胞来源、传代、生长条件、培养基、转染后细胞培养基等各类技巧 ， 大大节省摸索时间和试剂耗材损耗 。
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4D-Nucleofector细胞核转染平台 ， 在小体积转染条件优化成功后 ， 可不改变转染条件 ， 直接用于大体积转染中 ， 一次获得最多1*10^9数量的细胞 ， 大大缩短实验时间 。
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统 ， 由1个主机加不同模块构成 ， 各模块可单独配置：
1.C模块（必选）：细胞核转染系统主机 ， 即核心模块（Core unit） ， 内置各类细胞转染程序 。
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2.X模块（可选）：最常选择的小体积转染模块 ， 用于各类悬浮细胞转染 。 允许使用2个电极杯和1个中通量16孔电极板条 。 其中电极杯为100uL体系 ， 适用于2*10^5至2*10^7数量细胞；16孔电极板条各孔为20uL体系 ， 适用于2*10^4至1*10^6数量细胞 ， 可同时转染16个样品 。
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3.Y模块（可选）：用于各类贴壁细胞的原位转染 ， 无需消化细胞 。 允许使用1个24孔电极板 ， 各孔为350uL体系 ， 可同时转染24个样品 。
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4.LV模块（可选）：用于一种细胞的大规模连续转染 。 允许使用电转盘 ， 其中小体积电转盘允许手动注射填充1mL ， 适用于1*10^7至1*10^8数量细胞；更大体积的电转盘允许以1mL体积不断进样 ， 配合储液罐或储液袋 ， 连续处理20mL体积 ， 最高可转染10^9数量细胞 。
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5.96孔模块（可选）：用于高通量细胞转染 ， 需要同时配置X模块 。 允许使用1个可拆卸的96孔电极板 ， 由6个16孔电极板条组成 ， 适用于2*10^4至1*10^6数量细胞 ， 可同时转染96个样品 ， 经常用于摸索转染条件 。
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【分析|核转仪使用方法和操作步骤】Optimized RNP transfection for highly efficient CRISPR/Cas9-mediated gene knockout in primary T cells.(J Exp Med,2018,215(3):985-997)
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